viernes, 28 de noviembre de 2014

Practica 2 "Acción de la amilasa sobre el almidón"

Universidad Nacional Autónoma de México.
Colegio de Ciencias y Humanidades Plantel Sur.

“Acción de la amilasa sobre el almidón”
(Práctica 2)


Autores:
Naranjo Flores Ana Sharon
Leyte Flores Andrea
Gutiérrez Villeda Guadalupe
Ayala Santiago Eros Benedicto
Ugalde Santos Erandi
EQUIPO 1
Gpo. 523


Dra. Ma. Eugenia Tovar Martínez.
Fecha de entrega: 17/09/2014

Introducción:
Las enzimas son catalizadores proteicos que aceleran la velocidad de las reacciones metabólicas que ocurren tanto a nivel celular como fuera de ellas, sin sufrir ellas cambios en su estructura. Para el proceso de digestión, las biomoléculas ingeridas en la dieta deben ser degradadas a sus componentes más sencillos para ser absorbidas a nivel del tubo digestivo y así llegar al lugar correspondiente a nivel celular donde participarán en diversos procesos metabólicos indispensables para el mantenimiento de una adecuada homeostasis. La digestión de los carbohidratos comienza en la boca, donde los alimentos se mezclan con la Amilasa salival que degrada los enlaces del almidón liberándose Maltosa, Glucosa y dextrinas de almidón que poseen todos los enlaces. La acción de las enzimas, por sus características físico-químicas, pueden afectarse por las condiciones presentes en el lugar de acción de éstas. Entre los principales factores que pueden modificar la acción enzimática tenemos:
a)    La temperatura:
Todas las enzimas muestran cierta termolabilidad, aunque para muchas
de ellas el aumento de la temperatura, hasta cierto límite, acelera la
velocidad de la reacción. Sin embargo, por que la mayoría de éstas son
estructuras proteicas, pueden ser desnaturalizadas a medida que se
aumenta la temperatura y así perder su actividad biológica. La
temperatura a la cual se observa la máxima actividad enzimática se
denomina Temperatura Óptima.

b)    El pH:
Por su característica proteica, muchas enzimas por el pH de donde se
encuentran pueden cambiar desde un estado ionizado (Con carga ) a uno
no ionizado ( sin carga), afectando así la actividad biológica de las
mismas.
Cada enzima posee un pH característico donde puede realizar su función
(pH óptimo), cualquier variación del mismo puede afectar la acción
enzimática y así afectar la velocidad de las reacciones químicas.


c)    Inductores e inhibidores:
Existen sustancias químicas que pueden afectar la interacción del
sustrato y la enzima, ya sea aumentando la actividad enzimática
(Inductores ) o disminuyéndola ( Inhibidores).
Los inhibidores tienen gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan a
determinar la especificidad de la enzima por el sustrato, la
naturaleza de losgrupos funcionales en el mantenimiento de la estructura activa de la enzima. Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima. De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, se han clasificado en :
• Inhibidores Reversibles.
• Inhibidores Irreversibles

Preguntas generadoras:
¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón?
La amilasa en una enzima que va a actuar sobre el polisacárido almidón hidrolizando sus enlaces, hasta degradarlos en glucosa.
La pepsina del jugo gástrico actúa sobre las proteínas de los
alimentos que se transforman en polipéptidos, que serán reducidos por
otros enzimas a unidades más sencillas.
¿Cómo está formado el almidón químicamente?
El almidón está formado por moléculas de amilasa y amilopectina unidos mediante enlaces O-glucosidicos.
El almidón es el principal polisacárido de reserva energética en los vegetales. Se acumula en forma de gránulos dentro de los plastos, sobre todo en las células de la semilla, de la raíz y del tallo.  El almidón está compuesto de: Amilosa: formado por -D-glucopiranosas unidas mediante enlaces (1-4), formada por maltosa, en una cadena sin ramificar y por  Amilopectina: formado por -D-glucopiranosas unidas mediante enlaces (1-4),  de cadena ramificada cada 12 glucosas.

  


¿Qué es la amilasa desde el punto de vista químico?
La amilasa es la encargada de degradar y comenzar la digestión química de los alimentos.
¿Cuál es papel que desempeña el almidón en los animales?
El almidón desempeña un papel muy importante en los animales ya que actúa como sustancia de reserva energética. La digestión en los animales y algunas plantas, ocurre a niveles multicelular, celular y subcelular, la amilasa actúa sobre el almidón como lubricante y causa que las partículas de alimento se degraden con mayor facilidad.
¿Por qué es necesario para los animales que la amilasa actúe sobre el almidón?
Porque  si la amilasa no actuara sobre el almidón, el almidón no podría ser degradado  en moléculas simples, la glucosa, y no podría ser absorbida por las células.
En los seres humanos la amilasa actúa como un lubricante y facilita la degradación del alimento.

Hipótesis:
El almidón es un polisacárido y la amilasa una enzima que se encuentra en las glándulas salivales. Es por eso que la amilasa romperá los enlaces del almidón dando como resultado glucosa y maltosa. Mediante la prueba de yodo podremos identificar el almidón debido a que éste se tornara de color azul mientras que la prueba de Benedict nos permitirá identificar los azúcares reductores, tornándose rojo ladrillo si es positivo.
Objetivos:
·          Observa e identificar la reacción y la acción que tiene la amilasa (la saliva) ,como catalizador cuando está en el almidón para entender el procesó.
·          Identificar que contiene  la acción de la amilasa sobre el almidón
·          Aprenderemos a identificar la digestión enzimática realizada por la secreción de las glándulas salivales, como es que este proceso se relaciona con la digestión.

Procedimiento:
A. Obtención de la enzima amilasa
Después de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro  para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1  ml.
La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada, así se obtiene la preparación de enzima base.
Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada
Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima. En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2%.
 Los tubos se colocan en baño maría a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón
Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maría y se harán las pruebas del lugol y Benedict
B. Reacciones de lugol para almidón y Benedict
La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva.
La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Toma 1 ml de cada uno de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño María, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como la glucosa y la maltosa.

MATERIAL:
EQUIPO
LABORATORIO
BIOLOGICO
SUSTANCIAS
ž   Papel filtro
ž   Embudo
ž   5 tubos de ensayo
ž   2 goteros
ž   2 cápsulas de porcelana

ž   Nuestra de saliva

ž   Agua destilada
ž   Almidón
ž   Reactivo de Benedict
ž   Reactivo de Lugol para almidón

ž   Balanza granataria electrónica
ž   Parrilla con agitador magnético


Resultados:
Contenido del  Tubo
Reacción de Lugol
Reacción de Benedict
Amilasa+ almidón +agua
No reacciono
Si reacciono
Almidón+ agua
Si reacciono
No reacciono





Análisis de Resultados:
En está practica inferimos en cómo actúa la amilasa sobre el almidón ya que agregamos los indicadores de presencia o carencia de azucares, como el Lugol y el Benedict.
Como podemos observar el tubo que tiene el color morado nos indica la carencia de azucares, por lo que inferimos en que se rompieron los enlaces por la acción de la amilasa, y en donde se aprecia un color azul es el tubo donde se le agrego agua y almidón por eso podemos suponer que el agua no realizo cambio en el almidón.
En esta práctica observamos que la enzima amilasa es la que hace que el almidón se degrade ya que como inferimos en el otro tubo el agua no genero ningún cambio al almidón.


Conceptos clave:
o   Enzima: Proteína formada de aminoácidos.
o   Digestión:   La digestión es la reducción del alimento a moléculas pequeñas, capaces de incorporarse al metabolismo celular. La digestión puede ser extracelular o intracelular, según se realice fuera o dentro de las células.
o   Digestión química: La digestión química transforma los nutrientes en sustancias más simples y tan pequeñas que sean capaces de atravesar las paredes del intestino delgado y penetrar al sistema circulatorio. La digestión química ocurre en la boca, estómago e intestino delgado.
o   Degradación: Disminuir progresivamente las características o cualidades de algo.
o   Secreciones de glándulas del aparato digestivo: Secreción salivar, secreción gástrica, secreción pancreática, secreción biliar y secreción intestinal.
o   Reacciones químicas en el interior del cuerpo: Metabolismo.
o   Azúcares simples: Los carbohidratos simples son descompuestos rápidamente por el cuerpo para ser usados como energía y se encuentran en forma natural en alimentos como las frutas, la leche y sus derivados. La mayor parte de la ingesta de carbohidratos debe provenir de carbohidratos complejos (almidones) y azúcares naturales.
o   Azúcares complejos: Los carbohidratos complejos están hechos de moléculas de azúcar que se extienden juntas en complejas cadenas largas. Dichos carbohidratos se encuentran en alimentos tales como guisantes, fríjoles, granos enteros y hortalizas. Tanto los carbohidratos complejos como los carbohidratos simples se convierten en glucosa en el cuerpo y son usados como energía. Los alimentos que contienen carbohidratos complejos suministran vitaminas y minerales que son importantes para la salud de una persona.
o   Polímero: Los polímeros se definen como macromoléculas compuestas por una o varias unidades químicas (monómeros) que se repiten a lo largo de toda una cadena.
o   Monómero: Los monómeros son las unidades químicas que se repiten a lo largo de toda la cadena de un polímero.
Conclusiones:

Al combinar la saliva con el almidón, ambos disueltos en agua destilada y con temperatura de 37°C se coloca lugol y benedict en distintos tubos de ensayo y esperamos su reacción.
En uno se obtuvo un color azul intenso, este en el caso del lugol.
Mientras que en la mezcla con benedcit y la amilasa se obtuvo un colo rojo ladrillo.


Replanteamiento de la hipótesis:
Al realizar la práctica concluimos que la saliva produce una enzima llamada amilasa, la cual actúa sobre el almidón.
Nos pudimos percatar de la presencia del almidón gracias a la prueba con el lugol, y la presencia de los azúcares reductores gracias a la prueba de Benedict.


Referencias:
ž  








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